「羅馬劫掠」事件使得天主教帝國的皇帝卡洛斯受到了輿論的譴責。皇帝明白不能總將教皇放置於如此屈辱的狀態之中，必須求得和解。現在，問題轉移到了卡洛斯這邊。

那時，皇帝傳來了話，選定的新娘是朱莉婭公主。她是阿拉貢家族中唯一生存的王室女兒，相當於費代里科的表姐。朱莉婭長得很難看，而且已經40歲了。費代里科就連假裝接受也不願意，但伊莎貝拉·博斯凱蒂卻建議他結婚。她打的算盤是，朱莉婭是一個又丑又老的女人，所以不可能給費代里科生下孩子，而且他也不會愛上她。這樣一來，自己的孩子就能成為繼承者。伊莎貝拉默不作聲地看著伊莎貝拉·博斯凱蒂的這一舉動，沒有採取行動，她在等待著時機。

不過，挫敗了法國的野心並將那不勒斯與米蘭都收入囊中，可以說卡洛斯獲得了完美的勝利。1529年8月12日，他第一次將腳踏進義大利的國土——熱那亞，為了實現他長年的期望——在羅馬，讓教皇用雙手為他戴上神聖羅馬帝國皇帝的皇冠。可是，義大利人並沒有忘記兩年前的「羅馬那樁恐怖事件」。出於這一考慮，教皇與卡洛斯會見的地點選擇了羅馬與熱那亞中間的博洛尼亞。義大利各地的貴族們陸陸續續前往博洛尼亞。伊莎貝拉沒九_九_藏_書有理由錯過這一機會，11月，她也帶領著那些美麗的女官前往博洛尼亞。

但是，這一次，伊莎貝拉的女官們又發生了緋聞。西班牙與義大利的騎士們為了她們而爭鬥，結果一個晚上死了14個人。伊莎貝拉不得不火速帶領女官們離開博洛尼亞。儘管如此，年輕的卡洛斯皇帝依然對伊莎貝拉從心底里懷著善意與近乎尊敬之情。他誇讚了她的兒子們，據說在西班牙的宮廷里，卡斯蒂利奧內一直向他講述伊莎貝拉的事情，於是他答應在歸途中順便去一下曼托瓦。

1534年，弟弟阿方索去世。接著，米蘭公爵、烏爾比諾公爵以及與她同時代的人，幾乎都不在了。世代變更，但伊莎貝拉深以為豪的精神獨立並沒有表現出一丁點兒衰弱的跡象。雖然女兒埃萊奧諾拉、兒子埃爾科萊等人已經成為維多利亞·科隆納的沙龍中熱心的一員，但是，伊莎貝拉與維多利亞·科隆納的「宗教般清潔的精神結合」完全無關。

到了這個時候，伊莎貝拉終於開始有所行動。年輕的繼承者瑪爾格利塔的身邊，來自各地的求婚蜂擁而至。母親蒙費拉托侯爵夫人希望女兒與米蘭公爵弗朗切斯科·斯福爾扎結婚，米蘭公爵也是如此希望的。伊莎貝拉首先去說服母親侯爵夫人。在伊莎貝拉出色的外交面前，侯爵夫人根本不是對手。伊莎貝拉甚至說，「只要女兒同意的話」，立刻將費代里科派到瑪爾格利塔的身邊。在費代里科巧妙的求愛下，瑪九*九*藏*書爾格利塔被俘獲了。她說：「如果不能與費代里科結婚，那我就去當個修女。」伊莎貝拉同時還向教皇和皇帝採取了行動，賄賂了聽取費代里科懺悔的牧師，讓他在複雜宗教的教義之上編寫戲劇。其理由是：因為之前婚約無效時的懺悔不合教理，所以婚約無效不成立。對此，教皇與皇帝都不得不同意。而且，訂了婚的姐姐死後由妹妹替代，這樣例子也不是很少見。1531年7月，費代里科·貢扎加與瑪爾格利塔的婚事對外宣布。11月，年輕的新娘到達曼托瓦。三年後，蒙費拉托侯國與曼托瓦公國合併。

正如書齋的入口處掛著的她的座右銘「無望無懼」所顯示的一般，對於伊莎貝拉來說的人生，就是那裡，眼前就是人生。即便那並不是純潔的、美麗的。她雖然對維多利亞·科隆納彬彬有禮，但那並非尊重她的「高貴的精神」，而是因為維多利亞的外甥是當時最有勢力的阿方索·德·阿瓦洛斯（Alfonso d' Avalos）。如同伊莎貝拉期望的那樣，這個西班牙貴族後來與伊莎貝拉的孫女結婚了。

對於伊莎貝拉·德·埃斯特來說，兒子費代里科的婚事是她生命中最後的政治行為。年近60歲的她，在去世前的9年中，很多時候都在自己的書齋里靜靜地度過。宮殿中有兩個被稱為「洞穴」（GROTTA）與「書齋」（STUDIOLO）的房間，裏面用收集而來的眾多藝術品點綴著，雖然小卻有一個面向中庭的大窗戶，充足的陽光就從那裡照射進來。

可是，這個時機卻來得意外的早。年幼的蒙費拉托侯爵從馬上摔下來，突然去世了。read.99csw.com於是，繼承權就轉到了女兒瑪麗亞的身上。感到一切都提早了的是費代里科，他趕緊向教皇與皇帝寄去信函，請求說他有不能與朱莉婭結婚的理由。因為之前與未婚妻瑪麗亞的婚姻無效的手續還沒有辦好，所以與朱莉婭的訂婚是無效的。皇帝與教皇都大為震驚，不過還是將決定延期了。接著瑪麗亞也去世了，而繼承者這次變成了她的妹妹瑪爾格利塔。

伊莎貝拉此行的目的有三個。首先，將曼托瓦的侯爵地位升級至公爵；其次，如果順利的話，以當今米蘭公國的國主、外甥弗朗切斯科·斯福爾扎的病體為由，將米蘭與曼托瓦合併；最後，因為弟弟阿方索·德·埃斯特的費拉拉公國與歷代教皇之間關係不和，所以希望借卡洛斯的力量進行消解。為此，阿方索與伊莎貝拉之間經常信函來往，商量計策。

邁過50歲門檻的伊莎貝拉·德·埃斯特開始投擲她人生中決定最後勝負的骰子。都說「曼托瓦侯爵的價值很少」，在過於著名的母親之下，玩世不恭的兒子費代里科只是在情人伊莎貝拉·博斯凱蒂的懷中尋求慰藉，並不值得一提。伊莎貝拉的決戰對手是「羅馬劫掠」之後幾乎貫穿了義大利歷史的西班牙國王——神聖羅馬帝國皇帝卡洛斯。現在，所有的事情都取決於他的意志。她冷靜地計算著卡洛斯的實力，在不讓對方察覺的情況下利用他的實力來為自己做必要的準備。

1529年11月，在16位樞機主教的陪伴下，教皇克萊芒七世與另一位也是威風凜凜的、在盛大隊伍陪伴下駕著馬的卡洛斯，先後進入博洛尼亞城。從這個時候起，西班牙風格的黑白色服飾取代了迄今色彩鮮艷的文藝復興風格。這似乎也象徵著義大利文藝復興的崩潰。

皇帝在離開曼托瓦之前，為費代里科訂下了婚約。曼托瓦公九-九-藏-書爵已經30歲了，17歲的時候與當時8歲的瑪麗亞訂了婚，但是他為了情人伊莎貝拉·博斯凱蒂，向教皇請求婚姻無效，並獲得了許可。無效的理由據說是瑪麗亞的母親蒙費拉托侯爵夫人指使伊莎貝拉·博斯凱蒂的丈夫預謀毒殺費代里科與伊莎貝拉·博斯凱蒂，伊莎貝拉·博斯凱蒂的丈夫也因這莫須有的罪名被殺害。如今，曼托瓦現任國主費代里科的婚姻是政治婚姻，費代里科與伊莎貝拉·博斯凱蒂都明白這一點，所以她徹底放棄了自己成為公爵夫人的念想。

伊莎貝拉·博斯凱蒂的一切希望都落空了。10年的情人費代里科為了這樁婚姻拋棄了她，雖然不至於被流放，但她留下了孩子們后離開了曼托瓦。伊莎貝拉也許勝利了，但她在這10年來的敵人伊莎貝拉·博斯凱蒂的身上看到了與自己相似的特徵。

3月25日，順路經過曼托瓦的卡洛斯將費代里科晉陞為公爵。長子獲得了公爵的頭銜，次子埃爾科萊升為樞機主教，三子費蘭特已經被送至卡洛斯的宮廷，這時伊莎貝拉的身邊傳來了消息：代替奧朗熱公爵指揮皇帝軍隊的費蘭特攻陷佛羅倫薩。被視為文藝復興發祥地的佛羅倫薩共和國，在這一年瓦解了。

1537年6月，伊莎貝拉僅有的幾個同世代的朋友中的一位、老友樞機主教彼得羅·本博到曼托瓦來拜訪她。在他滯留的5天中，參觀了她那個現在被稱為「天國」的藝術品書齋。曼特尼亞、柯勒喬、貝里尼、提香的繪畫，米開朗琪羅的雕刻，希臘的大理石像及古羅馬諸多的雕刻https://read.99csw.com上都印滿了她的回憶。本博與依舊擁有年輕而生氣勃勃的精神的伊莎貝拉度過了一段難忘的日子。帶著這個深刻的印象，他離開了曼托瓦。數日後，伊莎貝拉的兒子埃爾科萊收到了來自本博的一封信。「您有一個非常優秀的母親。伊莎貝拉·德·埃斯特是我們這個時代最賢明和幸福的女士。」

最後的幾年，伊莎貝拉將熱情都傾注於一個名叫索拉羅洛（Solarolo）的小地方的統治上。她如其所願地對這個位於羅馬涅地區的小城市進行管理，進行清晰的行政區劃，徵收合理的稅款。現在從博洛尼亞往裡米尼去的路上，稍微偏離一點兒的地方有一個小鎮，鎮上的中心廣場被稱作貢扎加廣場。

兩年後，1539年2月13日，伊莎貝拉去世，時年65歲。

翌年2月22日，神聖羅馬帝國皇帝的皇冠經教皇之手，光輝燦爛地戴到了卡洛斯的頭上。每天晚上，賀宴舞會不斷。在那之間，伊莎貝拉的願望基本也都一一實現了。公爵晉陞一事已經獲得了卡洛斯皇帝的許諾。不過，關於米蘭公國合併一事，因為皇帝對米蘭公爵弗朗切斯科·斯福爾扎的親愛，而沒有希望實現。費拉拉與教會之間的和解也完全達成了。卡洛斯在加冕儀式之後，不顧教皇的反對，立即將阿方索·德·埃斯特叫到羅馬。阿方索是卡洛斯在義大利貴族之中唯一認可的具有統治能力的男人。3月初，急忙趕到羅馬的阿方索與教皇和解了。

她的這一統治受到了高度評價，人們都稱讚道：「這是一位應該生為女王的女士。」可是，這其實也是伊莎貝拉被兒子費代里科從曼托瓦國政中隔離出來后對寂寞的逃避。但是，她沒有抱怨，也從未想過取代兒子，因為她覺得已經為曼托瓦做了她應該做的一切。即使到了這個年紀，她依舊是一個快活的，而且非常時髦的女人。